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楼主: 宋梦阳
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PKH67染色

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楼主
发表于 2016-5-19 01:04:36 | 显示全部楼层
宋梦阳 发表于 2015-10-16 15:37
EXO染色步骤,已发

你好,能不能发我一份染色步骤,新手刚开始做外泌体,好多琢磨不明白。谢谢你拉1527109313@qq.com
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沙发
发表于 2016-5-19 01:30:34 | 显示全部楼层
惜名 发表于 2015-8-28 17:46
大师不敢当
PKH还是4ul。exo只定量过一次,刚开始做鉴定时定量的,后来做功能都没定量(太费)。 ...

想问一下BCA定量怎么去测外泌体,做一次记BCA需要多少量的外泌体?我看BCA说明书里,加96孔板做都需要1ml左右的外泌体量,但是我提的外泌体只溶解在了100ul的PBS里,所以一直很纳闷,想做BCA,但不知道怎么去做。求具体步骤 我邮箱1527109313@qq.com 非常感谢
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板凳
发表于 2016-5-19 01:34:27 | 显示全部楼层
宋梦阳 发表于 2015-10-13 11:19
我发现我现在是加了1ul的PKH67与750ul的Diluent C混合,然后EXO与250ul Diluent Ca混合,这样很节省,效果 ...

这个贴子实在是太赞了,有好多不懂的地方希望指点。Diluent Ca是什么溶液? 还有想要英文文献,继续留邮箱1527109313@qq.com 谢谢谢谢
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地板
发表于 2016-5-19 01:41:18 | 显示全部楼层
惜名 发表于 2015-12-18 08:44
这个要自己摸索浓度了。我做过6和12孔板,一般加30-100ul都可以获得满意结果。但是,也要根据你获得exo的 ...

问题又来了,几个细胞共培养的时候怎么保证加入的外泌体量都一致呢?是不是加之前,外泌体都需要做一个BCA定量啊。
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发表于 2016-5-19 01:58:43 | 显示全部楼层
宋梦阳 发表于 2016-2-26 11:42
好久没登陆了,已发送,请查收

能否发我一份PKH67染色步骤,非常感谢 1527109313@qq.com
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