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免疫小子 发表于 2016-6-14 21:27:13

外泌体BCA法测蛋白浓度的时候需要裂解吗？

现在看到好多老师测外泌体蛋白浓度的时候都裂解了EXO，但是我在文献上也有看到有些研究并没有裂解外泌体，而是直接测的表面蛋白，我想问一下这到底要不要裂解啊，两种方法有什么区别吗？还有就是一般10的6次方个细胞能得到多少外泌体呀？

徐风 发表于 2016-6-15 22:13:56

   The authors usually obtain 0.3 to 0.5µg of exosomes per 106 dendritic cells in 24 hr (Segura et al., 2005).
    Given the lack of details in the literature, it is difficult to say today whether all cell types produce exosomes and at what level, but exosome production seems to be a rather general mechanism, and an average level of production of ∼0.1 µg/106 cells may be taken as a rough general estimate.

免疫小子 发表于 2016-7-4 10:42:55

徐风 发表于 2016-6-15 22:13
The authors usually obtain 0.3 to 0.5µg of exosomes per 106 dendritic cells in 24 hr (Segura e ...

非常感谢啊知道啦

中义 发表于 2016-9-23 17:17:16

直接测和裂解后测都可以，我对比过一次。

五仁 发表于 2016-9-24 00:08:24

中义 发表于 2016-9-23 17:17
直接测和裂解后测都可以，我对比过一次。

对比效果如何？

中义 发表于 2016-9-29 12:42:26

五仁 发表于 2016-9-24 00:08
对比效果如何？

测试结果相近。

LarryYang 发表于 2017-1-12 00:46:58

中义 发表于 2016-9-29 12:42
测试结果相近。

那请问下，裂解后的还要离心取上清吗，像细胞一样？还是说不用离心？

exosun 发表于 2017-2-21 23:39:25

LarryYang 发表于 2017-1-12 00:46
那请问下，裂解后的还要离心取上清吗，像细胞一样？还是说不用离心？

不用，因为无论是kit或超离后得到的外泌体已经把较大的杂质都去除了，你小转速离心也离不出什么的。

中义 发表于 2017-3-17 00:06:46

LarryYang 发表于 2017-1-12 00:46
那请问下，裂解后的还要离心取上清吗，像细胞一样？还是说不用离心？

支持楼上的，不过我是按照细胞裂解后转速离心取上清的。不裂解也可以，建议不裂解

zhixiarensheng 发表于 2017-4-27 20:13:19

中义 发表于 2017-3-17 00:06
支持楼上的，不过我是按照细胞裂解后转速离心取上清的。不裂解也可以，建议不裂解 ...

不裂解直接加上样缓冲液电泳吗 ？

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