外泌体-小膜泡大作用！ › 标志蛋白鉴定 › 有没有用过Abcam的CD63抗体，来交流一下WB

Aoterdong 发表于 2014-12-19 16:28:32

有没有用过Abcam的CD63抗体，来交流一下WB

RT,大家跑WB的时候用的是还原性的loading buffer还是非还原性的loading buffer？

lonelyzhi 发表于 2014-12-23 13:40:03

用的是Santa的。。。。。

langlang007jj 发表于 2014-12-24 10:52:55

我用的也是Abcam的CD63抗体，之前没注意到要用非还原性的loading buffer，跑细胞总蛋白作为阳性对照三四次都没出，目前刚订了碧云天的非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X)，打算试一试，然后跟大家交流。

rubisco 发表于 2015-1-18 22:25:50

买了ABCAM的，但是还没有用，如果用细胞培养上清来做，大家一般用多少ml的上清来提取exosome？

zjm337 发表于 2016-9-26 11:15:33

langlang007jj 发表于 2014-12-24 10:52
我用的也是Abcam的CD63抗体，之前没注意到要用非还原性的loading buffer，跑细胞总蛋白作为阳性对照三四次 ...

你好，我用WB表征外泌体上的CD63，外泌体条带很明显，为什么细胞裂解没有跑出条带？？？

kao3234659 发表于 2017-2-14 06:00:47

一定要用非还原性，如果PELLET不是很大，最好不要煮样，室温溶解就好。

cj15521115192 发表于 2017-4-20 18:40:38

langlang007jj 发表于 2014-12-24 10:52
我用的也是Abcam的CD63抗体，之前没注意到要用非还原性的loading buffer，跑细胞总蛋白作为阳性对照三四次 ...

试出来了吗？ 结果怎么样

zhixiarensheng 发表于 2017-4-27 20:07:40

kao3234659 发表于 2017-2-14 06:00
一定要用非还原性，如果PELLET不是很大，最好不要煮样，室温溶解就好。

您好，请问您分离出的exosomes是用什么裂解的？需要裂解液裂解吗？还是直接加loading 煮过后跑western blot

kao3234659 发表于 2017-5-6 21:35:35

zhixiarensheng 发表于 2017-4-27 20:07
您好，请问您分离出的exosomes是用什么裂解的？需要裂解液裂解吗？还是直接加loading 煮过后跑western bl ...

加loading直接跑。

zhixiarensheng 发表于 2017-5-10 21:52:30

kao3234659 发表于 2017-5-6 21:35
加loading直接跑。

您好，我加loading直接跑的后蛋白几乎成一片了 ，怎么回事？2017-05-09_11-03-21 CD63 ...tif2017-05-09_11-03-21 CD63 ...tif

查看完整版本: 有没有用过Abcam的CD63抗体，来交流一下WB