微泡biomarker 发表于 2016-3-17 20:17:27

DTT对CD系列marker的影响

看了Thery, C., et al. (2006). "Isolation and characterization of exosomes from cell culture supernatants and biological fluids." Curr Protoc Cell Biol Chapter 3: Unit 3 22. 里面的表格写着 do not use 2-mercaptoethanol or DTT in sample, 请问有没有知道这是为什么啊？ 跪求答案

Bridgen桥生物 发表于 2016-3-17 22:01:24

因为DTT能破坏蛋白的双链，起到类似还原剂的作用

大鹏子 发表于 2016-3-18 11:00:38

Bridgen桥生物 发表于 2016-3-17 22:01
因为DTT能破坏蛋白的双链，起到类似还原剂的作用

DTT作为还原剂不是保护蛋白不被氧化的么，为什么会破坏蛋白的双链呢？？

Bridgen桥生物 发表于 2016-3-18 17:11:09

ㄧ般膜蛋白上面是靠多穿膜小蛋白所组成，组成过程中其中一个重要的键结是双硫键（-S-S-)，ㄧ但加了DTT或2-ME就会打断双硫键（-SH   HS-)这些穿膜小蛋白就不会结合在一起。抗体在设计的时候有可能认到这些穿膜小蛋白的连结处，ㄧ但加入DTT或2-ME，这破坏连结处，抗体就会认不到抗原。
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