anlinyuan 发表于 2019-9-6 18:48:54

血清外泌体超离方法

      想向大家求教一下外泌体超离的具体方法，我的步骤是2000g 20min 10000g 1h，0.22滤膜过滤，之后上110000g 2h，吸走上清剩0.5cm，加pbs重悬后110000g 2h，之后用30ulpbs重悬，用的是10.5ml离心管，测出来的浓度大概0.5-3ug/ul，可是wb跑不出来，做了电镜整个视野才找到俩囊泡，重复了有7、8次了也没找到原因，不知道为啥得率这么低，对了，我用的是类风湿关节炎的血清5-6ml，感觉要废，请求帮助

shuizhu 发表于 2019-10-9 14:25:06

请问怎么在血清中提取特定细胞的外泌体，谢谢

whulwj2019 发表于 2019-10-28 10:18:18

找到原因了么

zhangchao 发表于 2020-7-19 23:13:23

请问你解决了么问题？

奥之 发表于 2020-7-28 09:57:14

请问贝克曼超离机100000g对应多少rpm?

不止不行 发表于 2020-7-28 11:29:47

有篇nature的文章，稀释45倍后15,0000g超离过夜，然后PBS重选15,0000g 超离2h再收集，我用这个方法做wb可以检测到，具体可以看看那篇文章Nature 2015 Glypican1 identifies cancer exosomes and facilitates early detection of cancer

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