外泌体-小膜泡大作用！ › 标志蛋白鉴定 › 外泌体是否要加裂解液

桃花灼灼 发表于 2019-7-21 16:46:51

外泌体是否要加裂解液

最近在做WB，一直有个疑问，提取的外泌体在做WB前要不要加裂解液？看了有人说按1:1的比例加裂解液然后再加lading buffer的，比如我要10ul的外泌体做，那不是要加10ul的裂解液，这样会把外泌体稀释吗？而且WB每孔的上样量最大不超过20ul，我还要加loading buffer，岂不是超过了

邱邱-- 发表于 2019-7-26 15:05:30

我是加了裂解液的

桃花灼灼 发表于 2019-8-5 14:26:30

邱邱-- 发表于 2019-7-26 15:05
我是加了裂解液的

效果怎样呢

小白凯 发表于 2019-8-21 17:20:30

同问看有人说加裂解液和不加裂解液都可以，想问俩种跑WB有什么区别

邱邱-- 发表于 2019-8-26 10:46:29

桃花灼灼 发表于 2019-8-5 14:26
效果怎样呢

做鉴定是跑出来了 但蛋白浓度不高

caideyang 发表于 2019-9-2 11:31:32

我的也是，跑不出条带

zhangchao 发表于 2020-7-9 18:06:33

你好，请问外泌体的裂解你是怎么配制的呀

zhangchao 发表于 2020-7-9 18:07:15

邱邱-- 发表于 2019-7-26 15:05
我是加了裂解液的

你好，请问外泌体的裂解你是怎么配制的呀

邱邱-- 发表于 2020-9-29 09:06:36

就是普通的蛋白裂解液RIPA+PMSF(1:100)

杨同学 发表于 2021-6-9 20:58:43

加了，做不出，好像最少浓度要达到2ug/ml

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