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巨婴时代 发表于 2018-3-28 16:22:39

超离血清，得到很多粘稠沉淀在离心管壁上，正常吗

1ml血清100000g2h结束后，离心管壁上有明显一层沉淀粘附，并且很难溶解，但是外泌体感觉不会那么多，求问这些是什么？这正常吗？

巨婴时代 发表于 2018-3-28 20:57:58

求大神帮忙:'(

土豆 发表于 2018-3-29 20:02:14

我之前做过，是这样的，我感觉是血蛋白。需要马上重悬在PBS里再超离一次，洗完之后就好多了。

巨婴时代 发表于 2018-3-30 14:21:17

土豆 发表于 2018-3-29 20:02
我之前做过，是这样的，我感觉是血蛋白。需要马上重悬在PBS里再超离一次，洗完之后就好多了。 ...

我洗了一次，但是还是没拍到外泌体，想知道真正的外泌体沉淀是怎样的？

巨婴时代 发表于 2018-3-30 14:22:54

土豆 发表于 2018-3-29 20:02
我之前做过，是这样的，我感觉是血蛋白。需要马上重悬在PBS里再超离一次，洗完之后就好多了。 ...

能说下超离的具体现象吗，真正的外泌体沉淀是怎样的？

dlwlrma 发表于 2018-4-2 15:15:49

离血清看到过淡黄色的沉淀，离细胞上清没有见到过沉淀，pbs洗了拍能看到囊泡。就是其实培养上清要多，最后重悬的体积要小

ronaldchen 发表于 2018-4-3 14:12:40

你不会是直接超离血清的吧？前边2000g？10000g后在超离，应该没有淡黄色的沉淀的

巨婴时代 发表于 2018-4-9 15:32:49

ronaldchen 发表于 2018-4-3 14:12
你不会是直接超离血清的吧？前边2000g？10000g后在超离，应该没有淡黄色的沉淀的 ...

前面我是20000g30min，离得

hellzhu 发表于 2018-4-13 07:41:49

请问一下，你具体的离心步骤条件是怎么样的呢？我最近在超离血清样品，效果很不好啊。谢谢

ronaldchen 发表于 2018-4-15 12:30:02

巨婴时代 发表于 2018-4-9 15:32
前面我是20000g30min，离得

那你收血浆样本的时候有没有低速在高速离心后在冻-80.
我感觉你取血的时候没有离心后直接冻-80就会有这样的问题

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