八戒在五湖 发表于 2017-8-2 12:57:01

超离细胞上清过程中遇到的问题

我对细胞上清进行300g,2000g,10000g的离心,都未见管底有沉淀,然后用的0.20滤膜过滤,60mL上清超离,110000g,70min,超离底部未见沉淀,(这个细胞的培养基中是加了血清的,因为就想做个预实验看看能不能提出来,所以没用无血清培养基)但是再用PBS洗的时候,110000g,70min,离心后,底部正下方没有沉淀,底部周围有一圈白色的不明沉淀,不知道是啥,BCA定量的结果才0.4,还有问题就是对细胞上清进行300g,2000g,10000g的离心,都未见管底有沉淀,是正常的吗

纪南方 发表于 2017-11-1 11:22:36

是用水平转子还是定角,我之前提也是前面没沉淀,最后一步出现了,电镜结果出来以后再交流

wchl0918 发表于 2018-7-27 20:56:39

不会啊,通常血清自身就有外泌体啊,我自2000g起每步都有沉淀

济慈 发表于 2018-12-12 15:21:29

我们是用的超离,只是在最后一步才看到沉淀,也是偶尔能看到,但是做电镜结果都不错的
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