huang_0207 发表于 2017-7-30 10:18:50

western BCA 哪家好

最近要做western，但不知道BCA用哪家的试剂盒比较好，我看了下碧云天的，最低能检测出10ug/ml的样品。因为我的是从上清用试剂盒提取的，不知道含量够不够，请问各位兄台用的是哪家的BCA以及哪家的RIPA啊？

baishixiaoyaozi 发表于 2017-7-31 20:45:48

Pierce BCA protein assay with enhanced protocol

huang_0207 发表于 2017-7-30 10:20:41

赛默飞的Micro BCA™ Protein Assay Kit介绍说能检测到0.5 to 20 µg/mL，哪位用过

天道酬勤 发表于 2017-9-6 15:25:44

可以把细胞上清用100kd超滤膜浓缩下再用试剂盒提取，那试剂盒那么贵，直接提太浪费，BCA一般来说碧云天的就够用了

huang_0207 发表于 2017-9-6 15:58:42

天道酬勤 发表于 2017-9-6 15:25
可以把细胞上清用100kd超滤膜浓缩下再用试剂盒提取，那试剂盒那么贵，直接提太浪费，BCA一般来说碧云天的就 ...

非常感谢，最近正要这么做

Dr.zhs 发表于 2017-9-21 11:58:03

请问楼主这个问题解决了么，我手里只有碧云天的试剂盒应该能用吧。还有，你是如何提取外泌体里的蛋白的呢，是直接加等体积的裂解液么？谢谢。

huang_0207 发表于 2017-9-21 14:11:49

Dr.zhs 发表于 2017-9-21 11:58
请问楼主这个问题解决了么，我手里只有碧云天的试剂盒应该能用吧。还有，你是如何提取外泌体里的蛋白的呢， ...

就跟提细胞的蛋白一样呀，我一般加400ul的裂解液，4ulpmsf

Dr.zhs 发表于 2017-9-22 22:16:24

huang_0207 发表于 2017-9-21 14:11
就跟提细胞的蛋白一样呀，我一般加400ul的裂解液，4ulpmsf

谢谢啦，我看论坛里有的大神说不加裂解液，直接加loading煮，然后上样跑。你裂解后跑的western怎么样啊

Exosomeslover 发表于 2018-8-6 15:44:28

我们用的是康为家的BCA蛋白检测试剂盒。
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