可直接加1X loading buffer 95度5-10min,然后上样跑WB
版主是指离心底部直接用loading buffer 收集沉淀吗?但是这样不是没法测浓度了吗? Johnny 发表于 2015-5-23 19:17
对 不测浓度
跑western前,很多人会常规测下浓度,请教下,意义何在呢? 有没有好心人能提供下WB的详细方法 求外泌体提取后WB的详细方法,本人菜鸟一枚。十分感谢! Johnny 发表于 2015-4-3 17:34
你离心的步骤具体是怎么样的?
CD9没有条带应该是正常的,感觉不是所有的细胞分泌的exosome都有CD9。
从exocarta中能查到我所需要的细胞能表达哪些蛋白吗 songkai900818 发表于 2015-3-31 21:00
可以用PBS先洗一下,然后再加RIPA裂解,一般沉淀不会轻易被洗掉
加ripa裂解的时候是直接涡旋就行吗,然后就可以加loading buffer或者冷冻保存,还是还有别的步骤 Johnny 发表于 2016-10-8 13:04
貌似不能
好的,十分感谢:D Johnny 发表于 2015-5-23 19:17
对 不测浓度
不测浓度,就也不用保证跟对照的细胞总蛋白上样量一致是吗?所以也不用设内参是吗? luckkit 发表于 2015-4-1 13:12
谢谢楼上诸位,直接加4xloading buffer 95度10min,冻回-80度,明天上样跑WB
直接加4xloading buffer,不加裂解液吗?
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